貝克曼(màn)紅細胞裂解液(yè)中(zhōng)的(dí)裂解(jiě)法(fǎ)包括化(huà)學裂解(jiě),酶裂(liè)解和機(jī)械裂(liè)解.化學裂解和酶裂解(jiě)通常是比較溫和的方(fāng)法,通常(cháng)會(huì)很(hěn)少使DNA斷裂(liè)。化學(xué)裂(liè)解和(hé)酶裂解法主要(yào)是裂(liè)解(jiě)液(yè)處(chǔ)理法,主要(yào)根據不同的(dí)目(mù)的,裂解(jiě)液的組成有(yǒu)所(suǒ)不(bù)同,主要有(yǒu)提(tí)取(qǔ)核(hé)酸和蛋白兩中,在提(tí)取RNA或(huò)DNA時,我(wǒ)們主(zhǔ)要是要(yào)充(chōng)分裂(liè)解細胞(bāo),得到(dào)更多的(dí)核(hé)酸;如(rú)果我們的目的是蛋(dàn)白,那要(yào)根(gēn)據(jù)蛋白的(dí)位(wèi)置,特性(xìng)等(děng)因(yīn)素(sù)考慮裂解液(yè)。
貝克曼(màn)紅細(xì)胞裂(liè)解(jiě)液法(fǎ)分離(lí)純(chún)化骨髓間(jiān)充(chōng)質幹細(xì)胞(bāo),有(yǒu)以下(xià)優點:
1,經紅細胞(bāo)裂(liè)解液處(chǔ)理後(hòu)的骨髓(suǐ)液內含有大量各種促(cù)進細胞生(shēng)長的因子(zǐ)。紅(hóng)細胞及(jí)血(xiě)小板的胞漿內含有豐富(fù)的(dí)促(cù)細胞生(shēng)長因子,這(zhè)些(xiē)細(xì)胞(bāo)因子可促進(jìn)骨髓間(jiān)充質幹細胞的成(chéng)集落(là)的(dí)簇(cù)狀(zhuàng)生長,為骨髓(suǐ)間(jiān)充(chōng)質(zhì)幹(gān)細胞(bāo)的生長提供(gōng)更(gēng)適(shì)應的(dí)微環(huán)境(jìng),以利(lì)於骨(gǔ)髓間充(chōng)質(zhì)幹(gān)細胞(bāo)的(dí)增(zēng)殖。
2,增(zēng)加(jiā)骨(gǔ)髓間(jiān)充質(zhì)幹細胞(bāo)的濃度,提(tí)高骨髓(suǐ)間(jiān)充質幹細(xì)胞的增殖速度。經(jīng)紅(hóng)細(xì)胞(bāo)裂解(jiě)液(yè)處理後,骨髓液(yè)內(nèi)細胞雜(zá)質明顯減少(shǎo),通(tōng)過(guò)離心(xīn)純化,可以得到純(chún)度(dù)更高的(dí)含有(yǒu)骨(gǔ)髓間充質(zhì)幹(gān)細(xì)胞(bāo)的骨(gǔ)髓(suǐ)液,進(jìn)而(ér)可以明(míng)顯較少骨髓間充質(zhì)幹細胞(bāo)的原代培養(yǎng)時(shí)間,提高骨髓(suǐ)間充質(zhì)幹細胞(bāo)的增(zēng)殖速(sù)度。
3,早期促進骨髓間(jiān)充(chōng)質(zhì)幹(gān)細(xì)胞的貼(tiē)壁(bì)。實驗發(fā)現經紅(hóng)細胞(bāo)裂解液處(chǔ)理(lǐ)後,早(zǎo)期(qī)骨髓間充(chōng)質(zhì)幹細(xì)胞(bāo)的貼壁細胞數量明顯(xiǎn)較未(wèi)經紅細胞裂解液處(chǔ)理(lǐ)所獲(huò)得的(dí)數量(liáng)多(duō)。可能的原因為(wéi)經紅細(xì)胞裂解(jiě)液處理後(hòu)骨髓液(yè)內紅細胞及(jí)血(xiě)小板數量極少,影響骨髓(suǐ)間充質(zhì)幹細(xì)胞貼壁的雜質相對減少(shǎo),為(wéi)骨髓間充質幹細(xì)胞(bāo)貼壁保留出更多的空間,利於骨髓間(jiān)充(chōng)質幹細胞的早(zǎo)期貼(tiē)壁。