貝(bèi)克曼(màn)流(liú)式(shì)細(xì)胞(bāo)儀熒光(guāng)微(wēi)球一(yī)般指微球(qiú)的(dí)表麵(miàn)標有熒(yíng)光(guāng)物(wù)質(包括表麵(miàn)包(bāo)覆)或微(wēi)球體(tǐ)內結構(gòu)含有熒(yíng)光物(wù)質(如(rú)包埋(mái)或聚合(hé))的(dí)微球,受到外界能量刺激能激發(fā)出熒(yíng)光(guāng)。它是一種(zhǒng)載(zǎi)有熒光分子(zǐ)的(dí)功(gōng)能(néng)性微球,其(qí)外形一般為球(qiú)形。
貝克(kè)曼(màn)流(liú)式細胞儀熒光微(wēi)球(qiú)製(zhì)備(bèi)方法:
a,製備(bèi)聚苯(běn)こ烯納米微(wēi)球,並將其和(hé)帶(dài)有(yǒu)活性(xìng)基(jī)團的有(yǒu)機(jī)矽烷化(huà)學鍵合(hé),形(xíng)成表麵帶(dài)有(yǒu)活(huó)性基(jī)團(tuán)的微球,具體為(wéi)每(měi)100mLこ醇(chún)溶液中(zhōng)加入(rù)25g聚こ烯(xī)吡(pǐ)咯烷(wán)酮,1.06g過硫(liú)酸(suān)鉀,10g苯(běn)こ烯,所(suǒ)述(shù)こ醇(chún)溶(róng)液中(zhōng)こ醇與水的體(tǐ)積為(wéi)3:1,將(jiāng)配置好的每(měi)100mLこ醇溶液溶(róng)解後置(zhì)於超(chāo)聲波(bō)反(fǎn)應(yīng)器中(zhōng),通氮氣排除體係中的(dí)氧氣,開(kāi)啟超聲波(bō)發(fā)生器進行聚(jù)合(hé)反(fǎn)應,得(dé)到(dào)聚(jù)苯こ烯(xī)納米(mǐ)微球分(fēn)散(sàn)液,離(lí)心(xīn)搜(sōu)集聚(jù)苯こ烯(xī)納米微球,以5mL無水こ醇懸(xuán)浮(fú),加(jiā)入(rù)5μL氨基矽烷,攪拌(bàn)反應I小(xiǎo)吋,以(yǐ)等體(tǐ)積無水こ醇洗(xǐ)滌(dí)後(hòu)收(shōu)集;
b,將熒光(guāng)絡(luò)合物以化學鍵(jiàn)合摻雜於(yú)上(shàng)述微球(qiú)中,得到帶有熒光絡(luò)合物的微球(qiú),之後再以(yǐ)帶(dài)有活(huó)性基團的(dí)有機矽在微(wēi)球(qiú)表(biǎo)麵(miàn)引入(rù)活性基(jī)團(tuán),具體(tǐ)為將lmg/mL的BCPDA按等(děng)體(tǐ)積加入到氨基化納米(mǐ)微(wēi)球(qiú)懸浮液中(zhōng),攪拌(bàn)15min,離(lí)心收集,懸浮於(yú)50mmol/L的(dí)pH=7.8磷(lín)酸鹽(yán)緩(huǎn)衝液(yè)中,加入等(děng)體積(jī)O.lmol/L的(dí)EuCl3溶(róng)液,避光攪(jiǎo)拌反應(yīng)IOmin;離心收(shōu)集後懸(xuán)浮於等體積(jī)無水こ醇溶液中,加入5μL氨(ān)基矽(guī)烷,攪(jiǎo)拌反應(yīng)I小(xiǎo)吋(dòu),以等(děng)體(tǐ)積(jī)無水(shuǐ)こ醇洗(xǐ)滌後收(shōu)集,即得到(dào)稀(xī)土貝(bèi)克曼(màn)流式細(xì)胞儀熒光(guāng)微(wēi)球標(biāo)記物(wù)。