液相(xiāng)色(sè)譜儀(yí)係(xì)統(tǒng)由(yóu)儲(chǔ)液器(qì)，泵(bèng)，進樣器，色(sè)譜柱(zhù)，檢(jiǎn)測器，記錄儀等(děng)幾部(bù)分(fēn)組成。儲液器(qì)中(zhōng)的(dí)流動相(xiāng)被高(gāo)壓泵打入(rù)係(xì)統，樣品溶液經(jīng)進樣(yàng)器進入流動相，被流(liú)動相載(zǎi)入(rù)色譜柱(zhù)（固(gù)定相）內，由於樣品(pǐn)溶液(yè)中的(dí)各(gè)組分在兩(liǎng)相(xiāng)中(zhōng)具有(yǒu)不同的分配係(xì)數(shù)，在(zài)兩相(xiāng)中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時，經(jīng)過反復(fù)多(duō)次(cì)的(dí)吸(xī)附-解吸的(dí)分配(pèi)過程，各(gè)組分(fēn)在(zài)移動速(sù)度(dù)上(shàng)產生較大的(dí)差(chà)別，被分(fēn)離(lí)成(chéng)單個組(zǔ)分依(yī)次從(cóng)柱(zhù)內流出，通(tōng)過檢(jiǎn)測(cè)器(qì)時(shí)，樣(yàng)品濃(nóng)度被轉(zhuǎn)換成電(diàn)信(xìn)號(hào)傳送到記錄(lù)儀，數(shù)據以圖譜形式(shì)打印(yìn)出(chū)來(lái)液(yè)相色(sè)譜(pǔ)儀(yí)主(zhǔ)要有(yǒu)進樣(yàng)係(xì)統，輸液係統(tǒng)，分(fēn)離係(xì)統(tǒng)，檢(jiǎn)測係(xì)統和(hé)數據處理係統(tǒng)，下麵(miàn)將分別(bié)敘述其(qí)各自的組成與特(tè)點(diǎn)。
進樣係(xì)統
一般采用隔膜(mó)注(zhù)射進(jìn)樣(yàng)器(qì)或高壓(yā)進(jìn)樣間(jiān)完成(chéng)進樣操作(zuò)，進樣(yàng)量(liáng)是恒定的(dí)。這(zhè)對(duì)提高(gāo)分析樣品的(dí)重復(fù)性是有益的。
輸(shū)液係(xì)統
該係統包括高(gāo)壓泵，流(liú)動(dòng)相(xiāng)貯存(cún)器(qì)和梯度(dù)儀三(sān)部(bù)分。高(gāo)壓泵的(dí)一(yī)般壓強為(wéi)l．47～4．4X10Pa，流(liú)速可調且穩定(dìng)，當高壓(yā)流動(dòng)相通(tōng)過(guò)層析柱時(shí)，可降低樣(yàng)品在柱(zhù)中(zhōng)的(dí)擴散(sàn)效(xiào)應(yīng)，可(kě)加快其在柱(zhù)中的(dí)移動(dòng)速(sù)度，這(zhè)對提高分辨率(shuài)，回(huí)收(shōu)樣(yàng)品(pǐn)，保持樣(yàng)品的生物(wù)活(huó)性等都是有(yǒu)利的(dí)。流(liú)動相貯存器和梯度儀(yí)，可(kě)使流動(dòng)相隨固(gù)定相和樣品的性(xìng)質(zhì)而改變，包(bāo)括(kuò)改變洗脫液(yè)的(dí)極(jí)性，離子(zǐ)強(qiáng)度(dù)，PH值，或(huò)改(gǎi)用競爭性(xìng)抑製(zhì)劑(jì)或(huò)變(biàn)性(xìng)劑等。這就可使各(gè)種(zhǒng)物質（即(jí)使(shǐ)僅(jǐn)有(yǒu)一個基團(tuán)的差別(bié)或是同(tóng)分(fēn)異(yì)構體）都(dū)能獲得有效(xiào)分離。
分離係統
該(gāi)係統包括色譜柱，連接管(guǎn)和恒溫(wēn)器(qì)等。色(sè)譜柱一(yī)般(bān)長(cháng)度為10～50cm（需(xū)要(yào)兩根(gēn)連用時(shí)，可在二(èr)者之間(jiān)加一連(lián)接管(guǎn)），內(nèi)徑為2～5mm，由"不鏽鋼(gāng)或(huò)厚(hòu)壁玻璃管(guǎn)或(huò)鈦合金(jīn)等材(cái)料製成(chéng)，住(zhù)內裝有直徑(jìng)為(wéi)5～10μm粒度的固(gù)定(dìng)相（由基質(zhì)和固(gù)定液(yè)構成(chéng)）．固(gù)定(dìng)相(xiāng)中(zhōng)的(dí)基(jī)質(zhì)是(shì)由(yóu)機械(xiè)強(qiáng)度(dù)高(gāo)的樹脂(zhī)或矽膠構成(chéng)，它(tā)們都有(yǒu)惰性（如(rú)矽膠(jiāo)表麵(miàn)的矽酸基因基本已(yǐ)除去(qù)），多孔性(xìng)（孔徑可達(dá)1000?）和(hé)比(bǐ)表(biǎo)麵積(jī)大的(dí)特點，加(jiā)之其(qí)表(biǎo)麵經(jīng)過機(jī)械(xiè)塗漬（與(yǔ)氣(qì)相(xiāng)色譜(pǔ)中固定相(xiāng)的(dí)製(zhì)備一樣(yàng)），或者用化(huà)學(xué)法偶(ǒu)聯各種(zhǒng)基因(yīn)（如磷(lín)酸(suān)基(jī)，季胺基(jī)，羥(qiǎng)甲基，苯(běn)基(jī)，氨基(jī)或各(gè)種長度(dù)碳鏈(liàn)的烷基等(děng)）或配體(tǐ)的(dí)有機化合(hé)物(wù)。因此，這類固定相對結構不同的物質(zhì)有良(liáng)好的(dí)選擇(zé)性。例如(rú)，在(zài)多孔性(xìng)矽(guī)膠(jiāo)表麵(miàn)偶聯(lián)豌豆(dòu)凝集素（PSA）後(hòu)，就(jiù)可以(yǐ)把(bǎ)成纖維細胞(bāo)中的一種糖蛋(dàn)白(bái)分(fēn)離(lí)出(chū)來(lái)。
另(lìng)外(wài)，固定(dìng)相基(jī)質粒小(xiǎo)，柱床(chuáng)極易達(dá)到均匀，致(zhì)密(mì)狀(zhuàng)態，極易降低渦(wō)流(liú)擴(kuò)散效(xiào)應(yīng)。基(jī)質粒度小(xiǎo)，微(wēi)孔淺(qiǎn)，樣品在(zài)微孔(kǒng)區(qū)內傳質(zhì)短(duǎn)。這(zhè)些對縮(suō)小譜帶寬度，提高分辨率(shuài)是(shì)有(yǒu)益(yì)的。根(gēn)據(jù)柱效(xiào)理論分析，基質(zhì)粒度(dù)小，塔(tǎ)板理(lǐ)論數(shù)N就越大(dà)。這也(yě)進(jìn)一(yī)步證(zhèng)明基(jī)質粒度小，會提(tí)高(gāo)分辨(biàn)率的(dí)道理(lǐ)。
再者，液(yè)相(xiāng)色譜的恒溫器可(kě)使(shǐ)溫(wēn)度從室溫(wēn)調(tiáo)到(dào)60C，通過改(gǎi)善(shàn)傳(chuán)質速度，縮(suō)短分析(xī)時(shí)間，就(jiù)可增加(jiā)層析柱(zhù)的效率。
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更新(xīn)時間(jiān)：2019-12-03 
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